分光光度計,是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器,通過對這些光譜線進行成分分析進而確定測量樣品的成分。
近年來,紫外及可見光分光光度分析已得到廣泛的應用,它不僅可以用于物質的鑒定及結構分析,而且還可以用于某些物質含量的測定。
分光光譜技術可用于:
通過測定某種物質吸收或發射光譜來確定該物質的組成.
通過測量適當波長的信號強度確定某種單獨存在或與其他物質混合存在的一種物質的含量.
通過測量某一種底物消失或產物出現的量同時間的關系,追蹤反應過程.
分光光度計的具體使用方法:
(1)儀器預熱。打開樣品室蓋(光門自動關閉)。開啟電源,指示燈亮,儀器預熱20 min。選擇開關置于“T”旋鈕,使數字顯示為“00.0”。
(2)旋動波長手輪,把所需波長對準刻度線。
(3)將裝有溶液的比色皿放置比色架中,令參比溶液置于光路。
(4)蓋上樣品室蓋,調節透光率“100%T”旋鈕,使數字顯示為“100.0T”。(如顯示不到100%T,則可加按一次。
(5)吸光度A的測量:儀器調T為0和100%后,將選擇開關轉換至A調零旋鈕,數字顯示應為“.000”。然后拉出拉桿,使被測溶液置入光路,數字顯示值即為試樣的吸光度A。
(6)測定完畢后,先打開樣品室蓋,再斷電源。比色杯應清洗干凈后,再貯放保存。