紫外可見光分光光度計的可測波長范圍為200一1000nm,也有波長范圍為200-400nm的紫外分光光度計,但前者較為普遍。紫外可見光分光光度計的構造原理與可見光分光光度計(如721型分光光度計)相似。由于玻璃吸收紫外光,因此單色器要用石英棱鏡或光柵。
紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質在一定濃度的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比,物質的顏色和它的電子結構有密切的關系,當輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基 態上升到激發態時,分子(或離子)就會在可見區或紫外呈現吸光,顏色的發生或變化是和分子的正常電子結構的變形聯系的。當分子中含有一個或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的原子基團),輻射就會引起分子中電子能量的改變。
紫外可見光分光光度計的三大結構組成部分:
1、光源
有鎢絲燈及氫燈(或氛燈)兩種。可見光區(360一1000 nm)使用鎢絲燈;紫外光區 (200一360 nm)則用氫燈或氛燈。
2、吸收池
由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材質。
3、檢瀏器
檢側器使用兩只光電管,一為氧化艷光電管,用于625一1000 nm波長范圍;另一只是銻艷光電管,用于200一625 nm波長范圍。光電倍增管亦為常用的檢測器,其靈敏度比一般的光電管高2個數量級。