752分光光度計的原理和使用方法
更新時間:2024-08-06 點擊次數:3978
752分光光度計具有自動化程度高,功能多,可塑性強等特點,在生化分析,生命科學研究,特別是DNA分析定量方面可發揮重要的作用。
原理:
752分光光度計由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統及數字顯示器等部件組成,儀器內部光路系統。從鎢燈或氫燈發出的連續輻射經濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進狹縫,此狹縫正好位于聚光鏡及單色器內準直鏡的焦平面上,因此進入單色器的復合光通過平面反射鏡反射及準直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排列的連續單色光譜,此時單色光譜重新返回到準直鏡,然后通過聚光原理成像在出射狹縫上。出射狹縫選出帶寬的單色光通過聚光鏡落在試樣室被測樣品中心,樣品吸收后透射的光經光門射向光電管陰極面。根據光電效應原理,會產生一股微弱的光電流。
752分光光度計的使用方法:
(1)將靈敏度旋鈕調到“1”檔(放大倍數zui小)。
(2)打開電源開關,鎢燈點亮,預熱30min即可測定。若需用紫外光則打開“氫燈”開關,再按氫燈觸發按鈕,氫燈點亮,預熱30min后使用。
(3)將選擇開關置于“T”。
(4)打開試樣室蓋,調節0%旋鈕,使數字顯示為“0.000”。
(5)調節波長旋鈕,選擇所需測的波長。
(6)將裝有參比溶液和被測溶液的比色皿放入比色皿架中。
(7)蓋上樣品室蓋,使光路通過參比溶液比色皿,調節透光率旋鈕,使數字顯示為100.0%(T)。如果顯示不到100.0%(T),可適當增加靈敏度的檔數。然后將被測溶液置于光路中,數字顯示值即為被測溶液的透光率。
(8)若不需測透光率,儀器顯示100.0%(T)后,將選擇開關調至“A”,調節吸光度旋鈕,使數字顯示為“000.0”。再將被測溶液置于光路后,數字顯示值即為溶液的吸光度。
(9)若將選擇開關調至“C”,將已知標定濃度的溶液置于光路,調節濃度旋鈕使數字顯示為標定值,再將被測溶液置于光路,則可顯示出相應的濃度值。